背景及概述[1]
又叫DTNB即(5,5'-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid))，是5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸的简称，DTNB一种广泛用于在生物化学领域的分析试剂，
制备[1]
一种5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸全合成方法，包括：
硝化步骤：向250mL配有搅拌器、冷凝管和温度计的三口瓶中，加入24.3mL(0.2mol)间溴中滴加28mL混酸，控制滴加速度，以使溶液的温度处于45-55℃，滴加完毕合，保持50℃反应2h，弃去酸层，有机相用萃取，合并萃取液，干燥，旋转蒸发得到浅黄色针状产品29.1g(0.135mol)，即2-硝基-5-溴，收率为67.4％，熔点为55-56℃；
氧化步骤：将21.6g(0.1mol)硝化步骤得到的2-硝基-5-溴加100mL水搅拌加热至50℃，加入800g 5wt％的高锰酸钾(0.253mol)溶液，保温反应，过滤去除沉淀物，滤液用1+1盐酸调节pH<1，收集析出物，干燥，得到2-硝基-5-溴-甲酸19.6g(0.0797mol)，收率为79.7％，熔点为138-140℃；
硫化步骤：将12.3g(0.05mol)氧化步骤得到的2-硝基-5-溴-甲酸加50mL水溶解，调节pH>3.5，搅拌加热至50℃，分批次加入65g 6wt％的硫化钠(0.05mol)水溶液，保温反应2h，用1+1盐酸调节pH<1，收集析出物，烘干，即得7.16g(0.0181mol) 5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸，收率为72.3％；
重结晶步骤：取5.95g(0.0150mol)硫化步骤得到的5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸，加入冰重结晶，得到5.42g(0.0137mol)精制后的5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸，收率为91.0％，熔点236-237℃。
应用[2-3]
CN201510097778.3公开了一种宫颈癌尿液检测试剂盒，包括容器1和容器2，其中容器1中含有2ml 5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸溶液，容器2中含有2ml磷钨酸溶液。本发明还公开了该试剂盒的使用方法，取受试者晨尿1ml，先滴加到含有DTNB溶液的容器中，静置2-5分钟，然后加入含有磷钨酸溶液的容器中，静置2-5分钟，观察溶液是否有颜色变化。通过显色反应，所述试剂盒可以方便快速地判断受试者是否患有宫颈癌。
CN201910277653.7报道了尿液巯基化合物无汞检测试剂及制备方法和应用。所述试剂包括缓冲液以及分散在缓冲液中的5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸和EDTA。所述制备方法是将上述组分计量混合。可应用于制备尿液巯基化合物无汞检测试剂的试剂盒。本发明提供的技术方案采用5,5-二巯基-2,2-二硝基甲酸作为巯基显色剂对尿液中巯基进行定性和定量分析，并成功将其改进为可以产品的尿液检测试剂，检测试剂组分环境友好，其中不再含有汞等重金属离子，使用后不会造成环境污染，也不再含有三氯等腐蚀性物质，提高了使用安全性，并且检测速率大大加快，从至少15分钟缩短至5分钟以内；综上所述，提供的检测试剂具有可操作性强，易于推广使用的特点，因此市场前景广阔。
主要参考资料
[1] [中国发明] CN201711494442.6 一种DTNB全合成方法
[2] CN201510097778.3一种宫颈癌尿液检测试剂盒
[3] CN201910277653.7一种尿液巯基化合物无汞检测试剂及制备方法和应用
