背景及概述[1]
2,4-二硝基肼(DNPH)比色法是测定蛋白质羰基含量的经典方法,被氧化后的蛋白质羰基含量增多,羰基可与2,4-二硝基肼反应生成2,4-二硝基腙,2,4-二硝基腙为红棕色的沉淀,将沉淀用盐酸胍溶解后即可在分光光度计上读取370nm下的吸光度值,从而测定蛋白质的羰基含量。2,5-二甲基甲醛-2,4-DNPH是一种化学物质,分子式是C15H14N4O4,可用作医药合成中间体。如果吸入2,5-二甲基甲醛-2,4-DNPH,请将患者移到新鲜空气处;如果皮肤接触,应脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤,如有不适感,就医;如果眼晴接触,应分开眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗,并立即就医;如果食入,立即漱口,禁止催吐,应立即就医。
DNPH与羰基化合物(例如2,5-二甲基甲醛-2,4-DNPH)的高度选择性反应可检测衍生的羰基化合物。其次,仅在氨基硝基芳族化合物的正离子化中才能观察到用于触发MS3断裂的羟基自由基的特征损失,从而可以选择性检测和断裂DNPH衍生的羰基。后,由于衍生剂如2,5-二甲基甲醛-2,4-DNPH的出现,特定碎片离子的出现将可能的假阳性识别减至少。有研究用DNPH与羰基化合物(例如2,5-二甲基甲醛-2,4-DNPH)表征由特定暴露产生的有毒和遗传毒性的羰基化合物,并用于监测羰基化合物的内源性形成,例如衍生自与脂质过氧化和氧化应激相关的炎症过程的羰基化合物。
主要参考资料
[1] A High Resolution/Accurate Mass (HRAM) Data-Dependent MS3 Neutral Loss Screening, Classification, and Relative Quantitation Methodology for Carbonyl Compounds in Saliva