背景及概述[1][2]
胺兰又称胺蓝；2,2'-[(9,10-二氢-4,8-二羟基-9,10-二氧代-1,5-蒽二基)二亚氨基]双(5-甲基磺酸)二钠盐；胺兰/胺兰；胺兰O。
胺兰为光敏剂凝胶，具有以下几大优势：凝胶制剂具有一定的粘性和附着性，可以使药物停留在患病部位提高治疗效果。另一方面胺兰是一种核酸倾向的嗜酸性染料，停留在细胞核成分较多的组织中。在组织中具有较好的穿透深度，可有效的分布于感染的靶组织，但不能穿透正常组织，这样避免了正常组织受到光动力对其的杀伤，所以胺兰对病变区域、细菌具有较好的选择性。重要的一点是，胺兰光敏剂无明显的毒副作用，这样减少了对人类健康系统的危害，有利于光动力疗法的推广与应用。
胺兰
应用[3]
胸腹水、妇科脱落细胞多功能快速染液
染液的组成：
配方：成份硫堇、胺兰、磷酸三钠、水
比例为 1∶2∶1∶10
配制法：将硫堇、胺兰与水混合后，充分摇匀然后再加入磷酸三钠混合并将染液过滤即可。
使用方式：对各种脱落细胞涂片待其略干后滴上此染液3-4滴充分覆盖涂片膜面，约30秒到1分种后用其流水冲洗即可湿片镜检。需油镜观察者待涂片干后加香柏油镜检。
优点：与传统的格兰氏、瑞氏染液及现有的妇科白带涂片多功能染色液检测试剂相比其优点如下：
一是同一张涂片本染液所染细胞背景十分清晰，细胞核、浆一次染成，并红蓝分明，各种被染的脱落细胞、细菌、真菌颜色鲜亮形态清晰，形似一张彩色图片；而用传统的染色液出的背景多不清晰，核、浆模糊不清及染色程序复杂；不论是传统的染色液还是妇科白带涂片多功能染色液，它们均是核、浆必须分两次染色；次先将核染色后、第二次才能将浆染出色；且不能一液多用。
二是同一患者、同一涂片用本染液染色出的阳性率高于传统染色液染出阳性率60％；高于妇科白带涂片多功能染色液染出的26％；
制备[2]
1.吲达胺的合成
在圆底烧瓶中将5g二盐酸N，N-二甲基对二胺粉末加入到155g的USP(美国药典)纯水中，并在300rpm下搅拌。该N，N-二甲基对二胺反应混合物20应维持≤10℃，搅拌10分钟。
通过将6.3g盐酸(6N)缓慢加入到2.8g的邻胺中来制备盐酸邻胺。盐酸邻胺溶液22应搅拌至澄清，如果出现晶体，应加入少量的USP纯水以将盐酸邻胺晶体再溶解。
将盐酸邻胺溶液22加入至二盐酸N，N-二甲基对二胺反应混合物20中，随后再加入2g HCl(6N)24。反应混合物应维持在低于约10℃，并在冰浴上搅拌45分钟。
使用滴液漏斗将29.25g重铬酸盐溶液28缓慢(超过20分钟)滴加到盐酸邻胺和二盐酸N，N-二甲基对二胺的反应混合物26中，所述重铬酸盐溶液28通过将9.39g重铬酸钾加入到108g的USP纯水中制备。一旦重铬酸盐溶液28已全部添加完毕，应将二盐酸吲达胺反应混合物30维持在低于约10℃，并在冰浴上搅拌60分钟。本领域技术人员应当理解，反应混合物包括二盐酸吲达胺及其衍生物。
2.S-吲达胺基硫代根的合成
通过将8.75g十六水合铝加入至15g的USP纯水中来制备铝溶液32，进而得到酸。将该酸添加到二盐酸吲达胺反应混合物30中并搅拌10分钟。除了十六水合铝以外的酸也是适合的。
通过将12.22g氯化锌加入至15g的USP纯水中来制备氯化锌溶液34，进而利用氯化锌溶液34得到络合剂。将该络合剂添加到二盐酸吲达胺反应混合物30中并搅拌10分钟。应当理解，虽然所述优选实施方式包括氯化锌，但其它络合剂也是适合的，并包含在本发明中。
通过将9.39g重铬酸钾加入到108g的USP纯水中制备重铬酸盐溶液36，进而通过准备29.25g的该重铬酸盐溶液36而得到氧化剂。用滴液漏斗将该氧化剂缓慢(超过20分钟)加入至二盐酸吲达胺反应混合物30中，并在冰浴上搅拌20分钟。
通过将6.53g五水合硫代钠加入到15g的USP纯水来制备硫代钠溶液38，进而得到含硫亲核试剂源。将该含硫亲核试剂源缓慢加入到二盐酸吲达胺反应混合物30中，并在冰浴上搅拌60分钟。所形成的沉淀含有S-吲达胺基硫代根40及其衍生物。本领域技术人员应当理解，也可用其他的含硫亲核试剂源来代替硫代钠溶液38。
3.胺兰和胺兰锌复盐的合成
将S-吲达胺基硫代根40维持在10℃以下。用滴液漏斗将氧化剂缓慢(超过20分钟)加入S-吲达胺基硫代根40中，并搅拌20分钟。目前相信，29.25g的重铬酸盐溶液42适合于用作氧化剂。
向经氧化的S-吲达胺基硫代根反应混合物44中加入络合剂，优选加入27.0g的氯化锌溶液46，并搅拌5分钟，所述氯化锌溶液46通过将12.22g氯化锌加入到15g的USP纯水中制备。加入氧化催化剂，优选为17.3g的铜溶液48，并搅拌5分钟，所述铜溶液48通过将2.38g铜加入到15g的USP纯水中制备。
将温度设定点变为60℃。一旦反应达到60℃，加入酸，将pH值降到2.9，所述酸优选为溶液50(9N)。每次加酸后搅拌5分钟。将温度设定点变为97℃。一旦反应混合物达到97℃，搅拌35分钟。将反应混合物52缓慢冷却至室温。达到室温后，将含有粗胺兰产物混合物54的产物放入5℃冷却器中。保存5～15小时。取出，并将部分粗胺兰产物混合物54通过0.45μm的过滤器过滤。将经过滤的溶液放入小瓶中以通过RP-HPLC(反相高效液相色谱)胺兰分析方法进行分析。
主要参考资料
[1] 褚庆辉. (1997). 胺兰的电化学行为. 分析化学(7), 829-831.
[2] 达古拉, 曹高娃, & 张力. (2004). 胺兰褪色光度法测定cr(Ⅵ). 内蒙古民族大学学报(自然科学版), 19(5), 516-517.
[3] 梁锐. (2006). 用胺兰染液做宫颈涂片染色. 山西中医学院学报, 7(1), 27-27.
